| 產(chǎn)品名稱 |
人膽囊成纖維細(xì)胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4196 |
| 組織來源 |
人膽囊組織中分離提取，屬第一代凍存 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
纖維細(xì)胞是來源于中胚層的間充質(zhì)細(xì)胞。它被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞和分子的研究。這主要是因為它是一種較容易培養(yǎng)的，耐受性較好的細(xì)胞，可應(yīng)用于從基因轉(zhuǎn)染到顯微注射等多種操作[1]。成纖維細(xì)胞分泌一種非剛性細(xì)胞外基質(zhì)，其中含有豐富的I型和III型膠原[2]。他們負(fù)責(zé)在結(jié)締組織中合成細(xì)胞外基質(zhì)，并且在傷口愈合中起著重要作用。人膽囊成纖維細(xì)胞負(fù)責(zé)合成類花生酸，特別是前列環(huán)素。長期刺激膽囊成纖維細(xì)胞將導(dǎo)致前列環(huán)素表達上調(diào)和釋放，這種酸將有助于形成早期急性膽囊炎。HGBF是一種全能細(xì)胞可應(yīng)用于不同領(lǐng)域的研究，其中包錨點括急性膽囊炎的早期。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
