| 產(chǎn)品名稱 |
大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-682 |
| 組織來源 |
SD大鼠（出生1-3天），5-7只 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 細(xì)胞形態(tài) |
梭形、多角形 |
| 培養(yǎng)基 |
DMEM高糖培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、膠質(zhì)細(xì)胞生長添加劑、Insulin、Penicillin、Streptomycin等 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
星形膠質(zhì)細(xì)胞，是膠質(zhì)細(xì)胞中體積最大的一種。從胞體發(fā)出許多長而分支的突起，伸展充填在神經(jīng)細(xì)胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔神經(jīng)細(xì)胞的作用。 纖維性星形膠質(zhì)細(xì)胞多分布在腦脊髓的皮質(zhì)，突起細(xì)長，分支較少，胞質(zhì)中含，多分布在灰質(zhì)，細(xì)胞突起粗短，分支多。胞質(zhì)內(nèi)膠質(zhì)絲較少，又稱苔狀細(xì)胞。電鏡下星形膠質(zhì)細(xì)胞的胞核有缺失，胞質(zhì)較清亮，游離核糖核蛋白體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)均很少，糖原顆粒豐富，有大量的膠質(zhì)絲。纖維形星形膠質(zhì)細(xì)胞的突起呈長圓柱形，而原漿性星形膠質(zhì)細(xì)胞的突起呈薄片狀，并常包裹著神經(jīng)細(xì)胞及其突觸。星形膠質(zhì)細(xì)胞的腳板與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間相隔一層基板，腳板質(zhì)膜與基板接觸處有半橋粒結(jié)構(gòu)。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
